接上期介绍6篇成果筛选抗原后，需要获得抗原特异性T细胞。为了给研究者清晰展现T细胞活化的基本策略, 我们将从如下6个维度横向比较6篇文献：
- 呈递细胞来源
- 呈递细胞是否通过基因工程过表达抗原
- T细胞来源
- 是否抗原刺激T细胞
- 是否细胞因子刺激T细胞
- 是否分离抗原特异性T细胞
Neoantigen-targeted CD8+ T cell responses with PD-1 blockade therapy
发表于Nature 杂志(2021年影响因子 69分 )
1、呈递细胞来源：患者PBMC，肿瘤浸润淋巴细胞TILs周围肿瘤细胞
2、呈递细胞是否通过基因工程过表达抗原：无
3、T细胞来源：患者PBMC，肿瘤浸润淋巴细胞TILs
4、是否使用抗原刺激T细胞：无
5、是否使用细胞因子刺激T细胞：无
6、抗原特异性T细胞分离：使用DNA编码的pMHC荧光多聚体分离 (浩生医疗有售)
Broadly applicable TCR-based therapy for multiple myeloma targeting the immunoglobulin J chain
发表于Journal of Hematology & Oncology杂志(2021年影响因子 23分 )
1、呈递细胞来源: 改造为HLA-A1, -A24, -A3 or -A11阳性的K562作为呈递细胞
2、呈递细胞是否通过基因工程过表达抗原: 使用K562细胞过表达抗原
3、T细胞来源: 来源于健康志愿者的PBMC
4、是否使用外加抗原刺激T细胞：不使用
5、是否使用细胞因子刺激T细胞：通过PBMC和EBV-LCL细胞系作为滋养层细胞，PHA作为刺激源
6、抗原特异性T细胞分离：使用pMHC四聚体分离抗原特异性T细胞
Identification of HPV16 E1 and E2-specific T cells in the oropharyngeal cancer tumor microenvironment.
发表于Journal for Immunotherapy of Cancer杂志(2021年影响因子12分 )
1、呈递细胞来源: 肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)周围肿瘤细胞
2、呈递细胞是否通过基因工程过表达抗原：无
3、T细胞来源：肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)
4、是否使用抗原刺激T细胞：无
5、是否使用细胞因子刺激T细胞：无
6、抗原特异性T细胞分离：使用pMHC聚体分离抗原特异性T细胞
Generation of TGFβR2(-1) neoantigen-specific HLA-DR4-restricted T cell receptors for cancer therapy
发表于Journal for Immunotherapy of Cancer杂志(2021年影响因子12分 )
1、呈递细胞来源：人结肠癌细胞系HCT116 、SW48、K562改造为HLA-DRA and HLA-DRB1*0401阳性呈递细胞。
2、呈递细胞是否通过基因工程过表达抗原：使用BSM细胞系(HLA-DRA and HLA-DRB1*0401天然阳性) 过表达抗原
3、T细胞来源：健康志愿者的PBMC，作为人源T细胞来源；抗原肽免疫ABabDR4 mice作为模型动物T细胞来源
4、是否使用抗原刺激T细胞：使用目标抗原肽刺激
5、是否使用细胞因子刺激T细胞：未使用其他细胞因子刺激T细胞
6、抗原特异性T细胞分离：未使用流式、磁珠等方法分离抗原特异性T细胞
PRAME and CTCFL-reactive TCRs for the treatment of ovarian cancer.
发表于Frontiers in Immunology杂志(2021年影响因子8分 ) ：
1、呈递细胞来源：
细胞系：OVCA cell lines COV-318/-362.4/-413b/-434/-504/-641/-3 and SK-OV-3；
患者来源肿瘤细胞：一部分取自HLA-A*02:01阳性肿瘤患者，并取部分原代肿瘤细胞 改造为 HLA-A*24:02 、HLA-B*07:01阳性肿瘤细胞；
健康志愿者：CD14阳性DC细胞、CD19阳性细胞，细胞经IFN-γ刺激2、呈递细胞是否通过基因工程过表达抗原：无
3、T细胞来源：患者和健康人来源的T细胞，同呈递细胞来源
4、是否使用抗原刺激T细胞：无
5、是否使用细胞因子刺激T细胞：无
6、抗原特异性T细胞分离：使用pMHC聚体分离抗原特异性T细胞
Targeting the recurrent Rac1P29S neoepitope in melanoma with heterologous high-affinity T cell receptors.
发表于Frontiers in Immunology杂志(2021年影响因子8分 ) ：
1、呈递细胞来源：ABabDR4 mice 体内呈递细胞
2、呈递细胞是否通过基因工程过表达抗原：无
3、T细胞来源：抗原肽免疫ABabDR4 mice作为模型动物T细胞来源
4、是否使用抗原刺激T细胞：在使用抗原肽免疫ABabDR4 mice后，小鼠 T细胞体外也经突变抗原肽刺激，
5、是否使用细胞因子刺激T细胞：ABabDR4 mice T细胞体外经抗CD3/CD28抗体刺激
6、抗原特异性T细胞分离：使用pMHC聚体分离抗原特异性T细胞
Identification of T Cell Receptors Targeting a Neoantigen Derived from Recurrently Mutated FGFR3
发表于Cancers杂志(2021年影响因子6分 ) ：
1、呈递细胞来源：健康志愿者PBMC，单核细胞经IL4+GM-CSF+ IFN-γ+LPS刺激。
2、呈递细胞是否通过基因工程过表达抗原：无
3、T细胞来源：来自健康志愿者，CD8+ T细胞经分选后获得
4、是否使用抗原刺激T细胞：使用抗原肽体外刺激
5、是否使用细胞因子刺激T细胞：使用IL21+IL15+IL7刺激
6、抗原特异性T细胞分离：使用pMHC聚体分离抗原特异性T细胞
总结
本文总结6篇文章的第二阶段策略，其共同目标是获取抗原特异性T细胞。主要方式有两种：
1、直接使用pMHC多聚体捕获肿瘤浸润淋巴细胞TILs，不做刺激，后期将使用较复杂手段进行TCR研究。
2、构造抗原特异性呈递细胞，经过与T细胞共培养体外刺激，或ABabDR4 mice为主要模型的体内免疫，获取抗原特异性T细胞，后期进一步获取相关TCR进行研究。
